发明名称 新霉素菌种选育快速筛选方法
摘要 一种新霉素菌种选育快速筛选方法,通过接种发酵瓶、发酵液过滤、平板的培养基的准备、直接点样和抑菌圈的测量的步骤,根据菌种选育确定的数量,优先选择抑菌圈大的菌株进行生物效价确认,完成新霉素菌种选育快速筛选。本发明提供的新霉素菌种选育快速筛选方法,从而缩短菌种选育的周期,以前菌种选育周期要用5周时间,现在仅用一周时间,菌种筛选效率提高的80%;本发明提高菌种筛选效率和选育优良菌种的准确性,从而为新霉素发酵生产提供优良的菌种,为提高和稳定发酵生产水平提供了可靠保证。
申请公布号 CN101974435A 申请公布日期 2011.02.16
申请号 CN201010545450.0 申请日期 2010.11.16
申请人 宜昌三峡制药有限公司 发明人 何连明
分类号 C12N1/00(2006.01)I 主分类号 C12N1/00(2006.01)I
代理机构 宜昌市三峡专利事务所 42103 代理人 成钢
主权项 一种新霉素菌种选育快速筛选方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)接种发酵瓶:在无菌室内采用挖块接种法将新霉素单菌落斜面接于发酵瓶,将发酵瓶放入摇床上振摇,摇床转速250转/分;温度35±2度;培养时间135‑140小时,完成发酵瓶接种;(2)发酵液过滤:将发酵到终点的发酵瓶进行过滤,取其过滤液;(3)平板的培养基的准备:将生物检定培养基预热融化,在无菌室内倒入平板内,待培养基凝固后,再倒入内含敏感菌的检定培养基;(4)直接点样:将多个用滤纸制作成圆形纸片放置于平板培养基上,用进样器吸取发酵液的过滤液直接点在圆形纸片上,所有样品点完后,将平板培养基放入培养箱中进行培养,培养时间14‑16小时,培养温度36‑38度;(5)抑菌圈的测量:将培养24小时的平板从培养箱中取出,对每个抑菌圈进行测量,根据菌种选育确定的数量,优先选择抑菌圈大的菌株进行生物效价确认,完成新霉素菌种选育快速筛选。
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