利用微生物转化法生产天然香料γ-十二内酯的方法

摘要

本发明公开了一种利用微生物转化法生产天然香料γ-十二内酯的方法，其生产步骤包括：初筛、复筛、第一步发酵、第二步发酵，生产纯度可达97.9％的天然香料γ-十二内酯，该方法反映条件温和、操作简单、选择性高、生产成本低，原材料价廉易得，节省、维护自然资源，保护环境，有利于生态平衡，该生产方法可广泛的应用于内酯类香料的生产中。

主权项

一种利用微生物转化法生产天然香料γ‑十二内酯的方法，其特征在于按下述步骤制备：(1)初筛：选择能够利用硬脂酸作为能源并以油酸为底物的目标微生物；(2)复筛：选择合适的培养基配方将初筛得到的菌株进行复筛，得到生长旺盛的复筛菌株，目的为保证微生物转化过程中不以消耗油酸作为能量来源，进而按照上述培养基配方加入油酸取代硬脂酸恒温振荡培养，反应后去除有机溶剂进行气相色谱分析后选取10‑羟基脂肪酸产率高的菌株进行后续反应；(3)第一步发酵：选取合适的培养基配方，在一定温度、时间下摇床培养，加入底物后继续培养若干时间之后完成发酵过程，对发酵液进行酸化处理并除去有机溶剂后进行气相色谱鉴定，上述菌株能将油酸转化为两种混合物，为10‑羟基脂肪酸和10‑羰基硬脂酸；(4)第二步发酵：10‑羟基硬脂酸转化为γ‑十二内酯，反应体系加入吐温80作为为表面活性剂提高菌种作用活性，在第一步实验粗提的10‑羟基硬脂酸中接种焙烤酵母，为增加反应体系的互溶性加入石蜡起到增溶作用，通过蒸馏将产品从石蜡中纯化，纯度可达97.9％。