METODOS Y COMPOSICIONES PARA LA INGENIERIA DE POLIPEPTIDOS.

摘要

Un método para desarrollar una proteína codificada por una molécula sustrato de ADN recombinando al menos una primera y una segunda moléculas sustrato de ADN, donde las al menos primera y segunda moléculas sustrato difieren entre sí en al menos dos posiciones de nucleótidos y cada una comprende una pluralidad de segmentos definidos, comprendiendo el método: (a) proporcionar un grupo de cebadores oligonucleotídicos puente, que comprende al menos un cebador para cada hebra de cada uno de la pluralidad de segmentos definidos, donde la secuencia del cebador es complementaria a al menos una unión con otro segmento definido; (b) amplificar los segmentos definidos de las al menos primera y segunda moléculas sustrato de ADN con los cebadores de la etapa (a) en una reacción en cadena de la polimerasa; (c) ensamblar los productos de la etapa (b) para generar una genoteca diversa de moléculas sustrato de ADN recombinantes; (d) escrutar o seleccionar las proteínas codificadas por los productos de la etapa (c) en busca de una propiedad deseada; y (e) recuperar al menos una molécula sustrato de ADN recombinante de la etapa (d) que codifica una proteína desarrollada.