一种甘草苷的分离制备方法

摘要

本发明涉及天然药物的分离，具体地说是一种甘草苷的分离制备方法，将甘草植物粉碎后，用10倍量水煎煮得到提取液，再浓缩得到浸膏，加入乙醇醇沉两次，然后通过6000Da分子量膜分离仪分离，膜分离透过液经X-5大孔吸附树脂分离，乙醇水洗脱，得到的大孔树脂分离组分经高效工业色谱柱分离，甲醇水梯度洗脱，收集洗脱液浓缩冷冻干燥即得甘草苷。本发明产品纯度高、制备量大，工艺稳定可靠；其特别适用于自中药甘草中分离制备大量的高纯度的甘草苷化合物。

主权项

一种甘草苷的分离制备方法，其特征在于：1)提取：称取甘草原药材，加入其重量8‑12倍的水煎煮提取2‑3次，每次1‑3小时，得到提取液，将提取液浓缩浓缩至相对密度为1.10‑1.15，得浸膏；2)醇沉：将浸膏中加入乙醇使乙醇体积浓度达到50‑70％，0‑4℃冷藏静置12‑24小时，过滤，取滤液浓缩至相对密度1.05‑1.10；再加入乙醇使乙醇体积浓度达到75‑80％，0‑4℃冷藏静置12‑24小时过滤，取滤液浓缩挥发除去乙醇，样品溶液经过10000‑25000转/分钟的高速离心机离心；3)过膜：将离心液经过截留分子量3000‑6000Da中空纤维膜分离仪分离，操作压力0.05‑0.3MPa，截留液弃去，透过液即为膜分离组分；4)X‑5大孔吸附树脂分离：将膜分离组分上样于X‑5大孔吸附树脂柱上，上样量与分离材料体积比为1∶100‑500，分别采用水和体积浓度30‑50％乙醇作流动相洗脱，每次洗脱的体积为3‑6个柱体积，流速为1‑3个柱体积/小时；循环洗脱，洗脱液浓缩，浓缩至浓度为0.15‑0.6克/毫升，过0.2‑0.4微米滤膜，即为甘草苷大孔树脂分离组分；5)工业色谱分离：以粒径5‑40微米的C18硅胶键合固定相为色谱填料，以甲醇和水为流动相，梯度洗脱，甲醇的体积浓度从0‑100％变化，收集目标组分，冷冻干燥即为甘草苷。