富含多磷酸化多肽的酪蛋白水解物和制备方法

摘要

本发明涉及富含多磷酸化多肽的酪蛋白水解物和制备方法。它是以酪蛋白为原料，采用蛋白水解酶进行适度水解，水解度控制在10％以内，沸水浴加热灭酶，采用5kDa超滤膜从反应体系中分离出各种产物多肽，再将该产物用1kDa的超滤膜进行截留，所得截留液采用钙-乙醇选择性沉淀磷酸肽，再将其用去离子水或挥发性盐溶液溶解，上样到强阳离子交换柱上，分离获得带多个磷酸化的多肽。采用喷雾干燥或冷冻干燥获得产品。最后采用液质联用对所得磷酸肽进行序列鉴定。本发明可选择性地获得具有更高活性的磷酸肽，在食品生物技术领域中具有良好的应用前景，并为磷酸蛋白质组学的研究提供很好的研究样品。

主权项

一种富含多磷酸化多肽的酪蛋白水解物，其特征在于它是以酪蛋白为原料，采用蛋白水解酶进行适度水解，水解度需控制10％以内，沸水浴加热灭酶，采用5kDa超滤膜从反应体系中分离出各种产物多肽，再将该产物用1kDa的超滤膜进行截留，所得截留液采用钙‑乙醇选择性沉淀磷酸肽，再将其用去离子水或挥发性盐溶液溶解，上样到强阳离子交换柱上，分离获得带多个磷酸化的多肽，采用喷雾干燥或冷冻干燥获得产品。