在重组大肠杆菌中生产人的类胰岛素生长因子-1的方法

摘要

本发明公开了一种在重组大肠杆菌中生产人的类胰岛素生长因子-1的方法：该方法由hIGF-1蛋白相关基因设计和合成、构建hIGF-1融合蛋白表达载体、用所述表达载体转化大肠杆菌宿主构建基因工程菌、用所述基因工程菌表达hIGF-1融合蛋白、hIGF-1融合蛋白的分离、用肠激酶切去hIGF-1融合蛋白的融合标签、通过培养NIH3T3细胞检测hIGF-1的活性等步骤组成；本发明采用串联表达的融合蛋白，N端为硫氧还蛋白，C端为hIGF-1，中间添加了6个His标签，使表达产物更加稳定，分离方法更简单，价廉，因此，本发明具有广泛的应用前景。

主权项

一种在重组大肠杆菌中生产人的类胰岛素生长因子‑1的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)设计和合成hIGF‑1蛋白相关基因：设计上下游引物，并合成hIGF‑1基因，合成的hIGF‑1基因具有SEQ ID NO.1所示的基因序列。(2)构建hIGF‑1融合蛋白表达载体。(3)用表达载体转化大肠杆菌宿主构建基因工程菌。(4)用基因工程菌表达hIGF‑1融合蛋白。(5)亲和层析分离纯化hIGF‑1融合蛋白。(6)用肠激酶切去hIGF‑1融合蛋白的融合标签。(7)阳离子交换分离纯化。