曼氏裂头蚴病ES抗原的制备方法

摘要

本发明公开了一种曼氏裂头蚴ES抗原的制备方法，采集自然感染的野生动物或实验感染的实验动物体内的曼氏裂头蚴；将分离出的曼氏裂头蚴洗涤后加入培养液中，加入青霉素和链霉素，5%CO237℃培养18h；将曼氏裂头蚴培养液用离心机4℃下2000g离心，吸取上清4℃透析，至培养液变为无色；将培养液加入大离心管中，用封口膜封口，置－80℃冷冻后，浓缩干燥，即可得到曼氏裂头蚴ES抗原；分装，－80℃保存备用。本发明将曼氏裂头蚴ES抗原作为诊断抗原，通过ELISA方法将其应用于曼氏裂头蚴病的诊断，具有高度的敏感性和特异性，稳定性和重复性良好，可实现对曼氏裂头蚴病早期、轻度感染的快速诊断及现场血清流行病学调查，易于大范围推广。

主权项

一种曼氏裂头蚴病ES抗原的制备方法，其特征在于：它包括下述步骤：第一步，曼氏裂头蚴的采集：曼氏裂头蚴采集自自然感染曼氏裂头蚴的野生动物体内或实验感染的实验动物体内；第二步，曼氏裂头蚴的体外培养：将分离出的曼氏裂头蚴用灭菌的生理盐水充分洗涤后，将其加入准备好的1640培养液中，同时加入100U/ml的青霉素和100U/ml的链霉素，5% CO2 37℃培养18h；第三步，曼氏裂头蚴ES抗原的制备：将培养后的曼氏裂头蚴培养液用离心机4℃下2 000 g离心5 min，然后吸取上清4℃透析，至透析袋内培养液变为无色；将透析好的培养液加入大离心管中，用封口膜封口，并在封口膜上留排气孔，置－80℃冷冻后，用快速真空浓缩系统浓缩干燥，即可得到曼氏裂头蚴ES抗原；测定该抗原的蛋白浓度，分装，－80℃保存备用。