一种转基因毕赤酵母工程菌株及其构建方法

摘要

本发明公开了一种转基因毕赤酵母工程菌株及其构建方法，旨在提供一种安全的能将苯基甲烷类染料脱色酶大量胞外分泌表达的工程菌株。本发明的技术方案是从嗜水气单胞菌DN322克隆三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD基因；将三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD基因与表达载体pPICZaA载体连接，构建质粒pPICZaA-tpmD；将构建的质粒pPICZaA-tpmD酶切线性化后，导入毕赤酵母菌Pichia pastoris X-33中；测定三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD基因转化进入了毕赤酵母菌Pichia pastoris X-33中，从而得到转基因毕赤酵母基因工程菌株。本发明主要用于环境修复和治理中。

主权项

一种转基因毕赤酵母工程菌株，其特征在于所述的工程菌株是将嗜水气单胞菌Aeromonashydrophila subsp DN322中的三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD基因与表达载体pPICZaA连接后导入毕赤酵母Pichia pastoris X‑33，构建而成的转基因工程菌，所述的转基因工程菌能胞外分泌三苯基甲烷类染料脱色酶，所述的TpmD基因序列如SEQ ID NO：1所示，所述的三苯基甲烷类染料脱色酶的蛋白序列如SEQ ID NO：2所示。