甘草药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明提供了一种甘草药材HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。首先，取甘草药材粉末，加入70％的乙醇水溶液，超声提取，并将上清液用微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。然后，进行高效液相色谱分析，色谱柱为Kromasil-C18(5μm，250×4.6mm)，流动相为0.8％的乙酸水溶液-乙腈；采用梯度洗脱方式；检测波长254nm；柱温30℃。吸取供试品溶液进样，得到甘草药材的HPLC指纹图谱。通过对16批次甘草药材HPLC指纹图谱的比对，确定其共有指纹特征，得到标准指纹图谱。利用标准指纹图谱可以有效监控甘草药材的质量。

主权项

一种甘草药材高效液相色谱指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：精密称取药材粉末10g，置于具塞容器中，加入50～85％的乙醇100～800mL，超声震荡45min，冷却后取上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液；(2)指纹图谱的制作：色谱分离柱填料5μm Kromasil‑C18，250×4.6mm；流动相0.5～2.0％乙酸水溶液‑乙腈；采用梯度洗脱方式0min→25min→50min→70min→95min，乙腈11％→28％→45％→60％→78％；流速0.8～1.2mL/min；检测波长254nm；柱温25～40℃；在此条件下分析供试品溶液，得到甘草药材的指纹图谱；(3)标准指纹图谱的确定：确定了20个共有特征峰，保留时间分别为：3.8min、8.6min、19.8min、22.0min、26.8min、32.Smin、35.0min、38.4min、40.4min、42.6min、43.8min、46.2min、59.9min、57.4min、60.4min、62.2min、68.8min、75.2min、80.8min、87.6min，这些共有特征峰构成了甘草药材的指纹特征，可作为甘草药材的标准指纹图谱。