水体环境中铜绿微囊藻噬藻体的巢式PCR检测方法

摘要

本发明属于分子生物学领域，涉及利用分子生物学技术对水体环境中铜绿微囊藻病毒(噬藻体)进行检测和评价的方法。本发明以自行设计的内外两条引物，建立了待检水体中铜绿微囊藻噬藻体的巢式PCR检测方法。该方法包括：基于铜绿微囊藻噬藻体Ma-LMM01的g91基因片段，利用Primer Express2.0软件设计合理的巢式PCR引物；对待检水样浓缩液中提取的噬藻体DNA基因片段进行巢式PCR扩增；PCR产物的纯化和测序；利用NCBI中的Blast软件进行多重序列比对分析，最后利用该检测体系对待检测水样中铜绿微囊藻噬藻体进行检测。通过该法已检测到滇池水样中一条与Ma-LMM01噬藻体有高达98％同源相关性的核苷酸序列。

主权项

水体环境中铜绿微囊藻噬藻体的巢式PCR检测方法，包括基于铜绿微囊藻噬藻体Ma‑LMM01的g91基因片段，设计巢式PCR引物；提取待检水样浓缩液中噬藻体DNA基因片段；利用引物对该基因片段进行巢式PCR外围引物和内围引物扩增；PCR产物的纯化和测序；进行多重序列比对分析。