转甜菜碱醛脱氢酶基因耐盐碱玉米环境安全性检测方法

摘要

本发明涉及一种转甜菜碱醛脱氢酶基因耐盐碱玉米环境安全性检测方法。有关转基因玉米花粉中外源基因表达蛋白在土壤中的降解存留情况的研究尚未见报道。本发明包括：(1)玉米的种植：挑选发育良好转甜菜碱醛脱氢酶BADH基因耐盐碱玉米种子，采用盆栽方式种植，常规管理；(2)盐胁迫处理：在玉米拔节期开始直至玉米植株抽雄，每隔4-7天灌浇氯化钠水溶液，每次灌浇1000ml/盆；(3)采集花粉与盐碱土混合进行花粉降解试验；(4)甜菜碱醛脱氢酶活性检测：在分解30天时取样，提取甜菜碱醛脱氢酶，采用分光光度计法测定甜菜碱醛脱氢酶活性。

主权项

一种转甜菜碱醛脱氢酶基因耐盐碱玉米环境安全性检测方法，其特征是：该方法包括如下步骤：(1)玉米的种植：挑选发育良好转甜菜碱醛脱氢酶BADH基因耐盐碱玉米种子，采用盆栽方式种植，盆深45‑55cm，盆直径45‑55cm，常规管理；(2)盐胁迫处理：在玉米拔节期开始直至玉米植株抽雄，每隔4‑7天灌浇氯化钠水溶液，每次灌浇1000ml/盆；(3)采集花粉与盐碱土混合进行花粉降解试验：玉米开始散粉后收集0.1g花粉与3.15g土壤充分混匀，放入盖子上打有Ф2mm小孔的50ml离心管中，加入0.965ml蒸馏水，放进人工气候箱，保持黑暗，进行花粉降解试验；(4)甜菜碱醛脱氢酶活性检测：在分解30天时取样，提取甜菜碱醛脱氢酶，采用分光光度计法测定甜菜碱醛脱氢酶活性。