提高真菌产酶和次级代谢物的方法

摘要

本发明是一种利用真菌生产次级代谢物、蛋白和其它生物活性物质的方法，通过(1)孢子液制备、(2)种子培养、(3)发酵生产、(4)分离提取等步骤获得酶和次级代谢产物；采用的菌种为土曲霉、黑曲霉、变色栓菌、绿色木霉；发酵生产中添加非离子型表面活性剂泊洛沙姆F68作为的剪切力保护剂进行酶或代谢物的生产；本发明的积极效果是：通过在发酵培养基中添加剪切力保护剂，改善了因搅拌和通气产生的剪切力对代谢及产物合成的影响，提高了工业生产中真菌发酵生产酶和次级代谢产物的效率。

主权项

一种提高真菌产酶和次级代谢物的方法，其步骤为包括：(1)制备孢子液：将真菌菌种接种于马铃薯/葡萄糖/琼脂培养基上，在25～30℃温度下培养5～7天，孢子形成后，用生理盐水洗下孢子，其中孢子的数量可达到107/ml，用纱布过滤存放于4℃的冰箱内；采用的真菌菌种为土曲霉、黑曲霉、变色栓菌、绿色木霉丝状真菌；(2)种子培养：将步骤(1)得到的真菌孢子分别接种到种子培养基中，在25～30℃温度下、150～200rpm摇床中培养16～28小时，得到有众多菌丝或菌丝球的菌种培养液；其特征在于，(3)发酵生产：将步骤(2)得到的菌种培养液以10～15％的比例接种到添加有剪切力保护剂的发酵培养基中进行酶或代谢物的生产，在28～37℃温度下、于150～250rpm摇床中培养4～7天，获得含有酶或次级代谢物的发酵液；(4)将含有酶和次级代谢产物的发酵液进行分离、提取，获得酶和次级代谢产物。