一种快速诱导枣同质多倍体的方法

摘要

一种快速诱导枣同质多倍体的方法，即在枣离体叶片体细胞胚胎发生过程中同时进行秋水仙素诱变，使单细胞胚胎染色体得到加倍而发育成同质四倍体。该方法包括体细胞胚胎诱导和染色体加倍、胚状体发育成熟及同质四倍体的检测筛选。选取生长健壮、苗龄20～30d的枣组培苗叶片，用灭菌过的剪刀垂直叶脉剪切5～8刀。然后正面向上接种于诱导培养基MS+麦芽糖15～25g/L+琼脂3.0～5.0g/L+TDZ5.0～10.0mg/L+AgNO31.0～2.0mg/L上，培养基中同时附加秋水仙素15～20mg/L，暗培养40～50天。将枣叶片愈伤组织分化出的胚状体转接到MS+蔗糖40g/L+水解酪蛋白500mg/L的无激素培养基上光照培养，使其发育成体细胞胚苗。体细胞胚苗经过染色体或流式细胞仪检测即可筛选出同质四倍体。以上培养基的pH为5.0～6.0，培养温度25～30℃。该方法避免了嵌合体的出现，省略了分离纯化步骤，可快速获得同质多倍体，对加快枣的多倍体育种进程有重要应用价值。

主权项

一种快速诱导枣同质多倍体的方法，其特征是在枣离体叶片体细胞胚胎发生过程中进行秋水仙素诱变，体细胞胚再生后直接获得同质四倍体。