油菜茎基溃疡病菌实时荧光PCR分子检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种油菜茎基溃疡病菌实时荧光PCR分子检测试剂盒，包含基因表达通用混合试剂、ddH2O、探针与引物混合物及阳性对照。探针与引物混合物包含5μmol·L-1的LMpro探针、18μmol·L-1的LMf上游引物和18μmol·L-1的LMr下游引物；阳性对照为浓度为100ng/μL的油菜茎基溃疡病菌DNA溶液。本试剂盒可直接对油菜籽或植株病残体检测，快速、灵敏、准确、重复性好，尤其可用于检测病原菌含量较低的样品，特别适合对进出境油菜籽等花科作物的种子、植株及病残体中油菜茎基溃疡病菌的快速检测，具有良好的应用前景。

主权项

一种油菜茎基溃疡病菌实时荧光PCR分子检测试剂盒，其特征是包括如下试剂：基因表达通用混合试剂，ddH2O；探针与引物的混合物，包含5μmol·L 1的LMpro探针、18μmol·L 1的LMf上游引物和18μmol·L 1LMr的下游引物；阳性对照：浓度为100ng/μL的油菜茎基溃疡病菌DNA溶液；所说的LMf上游引物序列为5’ GTTTCCTTGGTGGGCTTGC 3’，所说的LMr下游引物序列为5’ TGTTACTGACGCTGACTGCAATT 3’，所说的LMpro探针序列为5’FAM ATTGGATCCCCTAAAACC NFQ MGB3’，其中，FAM为荧光报告基团，NFQ(Non Fluorescent Quencher)为非荧光淬灭基团，MGB(Minor Groove Binder)为修饰基团。