小麦黄矮病毒的多重PCR检测方法

摘要

本发明涉及小麦黄矮病毒的多重PCR检测方法，该方法包括小麦病毒总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板，多重PCR反应，电泳检测，确定病毒种类，其中逆转录反应制备cDNA模板应用引物SEQ ID NO.2、SEQ IDNO.4和SEQ ID NO.6，多重PCR反应中应用引物SEQ ID NO.1-6。应用本发明的多重PCR检测小麦黄矮病的方法对田间复合侵染的小麦材料检测具有快速、省时、节约成本等优势。

主权项

一种利用多重PCR反应同时检测小麦黄矮病种群中PAV、GPV、GAV三种病毒的方法，该方法包括小麦病毒总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板，多重PCR反应，电泳检测，确定病毒种类，其特征在于逆转录反应制备cDNA模板应用引物SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.6，多重PCR反应中应用引物SEQ ID NO.1 6，多重PCR反应的反应体系中，缓冲液浓度为0.4× 0.9×；dNTPs浓度为0.1 0.5mM；Mg2+浓度为1.0 3.5mM；退火温度为51 55℃；循环次数为20 45次；延伸时间为30 55s。