发明名称 |
一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白的制备方法及其用途 |
摘要 |
一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白,按如下方法制备:步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后,克隆至原核表达载体pET28a(+)中,得到编码CP蛋白质粒pETQβ-CP;步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置,即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间,插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT,并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T-2中,得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ-A1;步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌,诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ-2aa。使用异双功能交联剂将短肽抗原耦联至Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒。 |
申请公布号 |
CN101921733A |
申请公布日期 |
2010.12.22 |
申请号 |
CN201010028904.7 |
申请日期 |
2010.01.05 |
申请人 |
华中科技大学同济医学院附属协和医院 |
发明人 |
陈霄;周子华;廖玉华;陈芬;王敏;刘祖霞;邱志华;张晓丽 |
分类号 |
C12N7/01(2006.01)I;A61K39/00(2006.01)I;A61P31/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I |
主分类号 |
C12N7/01(2006.01)I |
代理机构 |
武汉开元知识产权代理有限公司 42104 |
代理人 |
王和平 |
主权项 |
一种Qβ 2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白,按如下方法制备:步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后,克隆至原核表达载体pET28a(+)中,得到编码CP蛋白质粒pETQβ CP;步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置,即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间,插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT,并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T 2中,得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ A1;步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌,诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ 2aa。 |
地址 |
430022 湖北省武汉市汉口解放大道1277号 |