食血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂在毕赤酵母中的表达方法

摘要

一种食血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂在毕赤酵母中的表达方法，通过在体外人工合成吸血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂(Bat-PA)的全长基因，再将其克隆到表达载体pPIC9K上，然后通过电穿孔的方法将线性化的重组质粒转化进入酵母细胞，进而稳定整合到酵母染色体上，该方法使食血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂特别是DSPAα1在毕赤酵母中稳定高效表达，从而降低生产成本，提高表达量，并使产生的重组蛋白具有天然蛋白的生物活性纯化后的蛋白可用于治疗各种血栓性心脑血管疾病。

主权项

一种食血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂在毕赤酵母中的表达方法，其特征在于，该方法通过下列步骤实现：在体外人工合成吸血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂(Bat PA)的全长基因，再将其克隆到表达载体pPIC9K上，对重组质粒进行线性化处理后，通过电穿孔的方法将线性化的重组质粒转化进入酵母细胞，进而稳定整合到酵母染色体上，重组酵母在发酵培养过程中经过诱导，吸血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂在信号肽的引导下分泌表达到培养基中。