一种热球菌产高温普鲁兰酶的方法及产品

摘要

本发明是一种利用热球菌(Thermococcus sp.HJ21)产生高温普鲁兰酶的方法。本发明还公开了按该方法得到的高温普鲁兰酶。该酶的酶学性质为：该酶作用的最适温度为95℃；在95℃的半衰期为3h，在100℃的半衰期为2h；该酶作用的最适pH为6.0；该酶在pH5.0～7.5范围内稳定。高温普鲁兰酶在酿造、淀粉加工、制糖等食品工业中对改良成品的某些特性有着特殊重要的作用。

主权项

一种热球菌株Thermococcus sp.HJ21产高温普鲁兰酶的方法，其特征在于，其步骤如下，(1)将种子液以5％接种量接种于产酶培养基，于88℃中静置培养18h；(2)取出发酵液冷却至室温，将发酵液用三层滤纸抽滤除去残余硫颗粒及杂质后，以10000r/min离心15min，除去菌体，取上清液盐析过夜；(3)每100ml上清液加39.6g的硫酸铵，然后再以11000r/min离心30min，取沉淀透析，透析结束后以12000r/min离心10min，除去杂质，所得上清液即为粗酶液；所述的产酶培养基为：基础盐溶液1000ml，将NaCl用25g取代19.6g，微量盐溶液10ml，1％CaCl2·H2O 5ml，N P混合液10ml，Fe EDTA混合液2ml，0.02％刃天青溶液5ml，PIPE 3.35g，蛋白胨7g，酵母粉5g，麦芽糖5g，硫5g，pH 6.5；种子液的制备为：将菌株接种改良的YPS培养基中，在88℃下静置培养6 8h；所述的改良的YPS培养基为：基础盐溶液1000ml，微量盐溶液10ml，1％CaCl2·H2O 5ml，N P混合液10ml，Fe EDTA混合液2ml，0.02％刃天青溶液5ml，PIPE 3.35g，酵母粉3g，蛋白胨3g，麦芽糖5g，硫5g，pH 6.5；所述的基础盐溶液g/L为：NaCl，19.6；Na2SO4，3.3；KCl，0.5；KBr，0.05；H3BO3，0.02；MgCl2，8.8；所述的微量盐溶液g/L为：CuSO4·5H2O，0.01；ZnSO4·7H2O，0.1；CoCl2·6H2O，0.005；MnCl2·4H2O，0.2；Na2MoO4·2H2O，0.1；KBr，0.05；KI，0.05；H3B03，0.1；NaF，0.05；LiCl，0.05；Al2(SO4)30.05，NiCl2·6H2O，0.01；VoSO4·2H2O，0.005；H2WO4·2H2O，0.002；Na2SeO4，0.005；SrCl·6H2O，0.005；BaCl，0.005；所述的N P混合液g/L为：(NH4)2SO4，43.0；NaNO3，60.5；KH2PO4，3.6；所述的Fe EDTA混合液g/L为：FeSO4·7H2O，1.54；Na EDTA，2.06。