小桐子快速繁殖的方法

摘要

本发明涉及小桐子快速繁殖的方法，小桐子种子消毒后在无菌条件下剥取种胚，接种于培养基，光照培养1个月；将子叶或真叶切割成的小块，接种于诱导培养基MS+TDZ0.1-0.5mg/L+IBA0.01-0.1mg/L+蔗糖30g/L+0.6-0.8%琼脂中，培养2周产生愈伤组织，继续培养2周，分化出不定芽；将不定芽转入增殖培养基gl+BA0.5-1.0mg/L+KT0.5-1.0mg/L+IBA0.01-0.1mg/L+AgNO31-5mg/L+蔗糖25~35g/L+0.6~0.8%琼脂中，生成组培丛芽；2-3cm的芽切下，接入发根培养基进行生根培养，获组培生根苗。本发明直接诱导子叶或组培苗叶片产生愈伤分化出不定芽，愈伤组织分化不定芽的过程，不需要更换培养基配方，且分化频率达90%，大大缩短了不定芽的诱导过程。

主权项

一种小桐子快速繁殖的方法，依序按下述步骤进行组织培养：第一步：将小桐子的种子消毒后，在无菌条件下剥取种胚，接种于1/2MS+蔗糖25～35g/L+0.6～0.8%琼脂的培养基中，pH5.8～6.2，进行光照培养28～35天，获得无菌实生苗；第二步：将无菌实生苗的子叶或真叶切割成0.4～0.6cm2的小块，接种于诱导培养基中，所述的诱导培养基为MS+TDZ0.1～0.5mg/L+IBA0.01～0.1mg/L+蔗糖25～35g/L+0.6～0.8%琼脂，pH5.8～6.2，培养12～16天产生愈伤组织，继续培养12～16天分化出不定芽；第三步：将不定芽转入增殖培养基进行继代增殖培养，所述的增殖培养基为gl+BA0.5～1.0mg/L+KT0.5～1.0mg/L+IBA0.01～0.1mg/L+AgNO3 1～5mg/L+蔗糖25～35g/L+0.6～0.8%琼脂，pH5.8～6.2，生成组培丛芽；第四步：将组培丛芽中2～3cm的芽切下，接入发根培养基进行生根培养，发根培养基为MS+NAA0.5～1.5 mg/L+蔗糖15～25g/L+0.6～0.8%琼脂，pH5.8～6.2，3～7天后转入MS+蔗糖15～25g/L+0.6～0.8%琼脂的培养基中，经10～20天生根，培养28～35天获得组培生根苗，进行移栽。