多步发酵法生产甘油的高产方法

摘要

一种多步发酵法生产甘油的高产方法，属于生物化工技术领域。通过通气量和转速的调节将发酵分为四个阶段分段发酵，工艺步骤为：将耐高渗酵母种子液按体积5～10％的接种量加入含葡萄糖浓度为250～380g/l的初始发酵培养基中，30～40℃条件下进行有氧发酵；每间隔6hr调高一次通空气量，最终通气量调到0.6～3.5vvm，搅拌转速70～600rpm，当葡萄糖浓度低于30～50g/l时，进入第三阶段的发酵，每间隔4～6hr调低一次通气量，最终通气量调到0vvm，搅拌转速10～50rpm，则进入第四阶段的厌氧发酵，当葡萄糖浓度低于2g/l时中止发酵。发酵结束后，将发酵液固液分离，将甘油分离、提纯，制备成产品。优点在于，使发酵后期残糖显著降低，而甘油不返耗。

主权项

一种多步发酵法生产甘油的高产工艺，通过通气量和转速的调节将发酵分为四个阶段分段发酵，具体工艺过程为：将酵母接入含10 50g/l葡萄糖的种子培养基中，30℃～37℃培养20～24小时，再将种子液按体积5～10％的接种量加入含葡萄糖浓度为250～380g/l的初始发酵培养基，30～40℃条件下进行有氧发酵，发酵过程中监测发酵液的pH值、菌浓、葡萄糖和甘油浓度，发酵12 24小时为第一阶段，每间隔5 7小时调高一次通空气量，根据罐子的容量及罐型，最终通气量调到0.6～3.5vvm，搅拌转速70～600rpm，继续发酵进入第二阶段，保持通气量和转速不变并监测葡萄糖、甘油浓度，当葡萄糖浓度低于30～50g/l时，进入第三阶段的发酵，每间隔4～6小时调低一次通气量，最终通气量调到0vvm，搅拌转速10～50rpm，则进入第四阶段的厌氧发酵，无论进入那个阶段，当葡萄糖浓度低于2g/l时中止发酵，发酵周期为72 96小时，发酵生产结束后，采用板框、膜过滤、离心手段将发酵液固液分离，清液通过浓宿、蒸馏、离子交换和脱色步骤将甘油分离、提纯，制备成产品；所述的酵母为克鲁斯假丝酵母；所述发酵方式为批次流加发酵。