实时定量PCR检测血液样品中癌细胞的方法

摘要

本发明提供了一种体外定量检测血液样品中癌细胞的方法，它包括以下步骤：用磁性分选技术从血液样品中分离上皮细胞粘附分子阳性细胞；从上述细胞中抽提RNA并获得cDNA；在端粒酶逆转录酶基因第1521-1819位核苷酸区间制备DNA标准品，在端粒酶逆转录酶基因第1657-1787位核苷酸区间设计引物及Tagman探针，用Taqman技术对端粒酶逆转录酶mRNA的拷贝数进行定量分析。本发明还提供了在体外检测样品中端粒酶逆转录酶的方法以及用于定量检测血液样品中癌细胞的试剂盒。

主权项

1.用于定量检测血液样品中癌细胞的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含引物，DNA标准品和Taqman探针，其中所述引物及探针是根据端粒酶逆转录酶基因第1657-1787位核苷酸区间设计得到，所述DNA标准品根据端粒酶逆转录酶基因第1521-1819位核苷酸区间制得，其中所述引物的序列如SEQIDNO：8、9所示，其中所述探针的序列如SEQIDNO：10所示，且其5′端与荧光报告基团相连，3′端与荧光淬灭基团相连，所述DNA标准品用SEQIDNO：6和7所示序列的引物扩增获得。