一种提高枯草芽孢杆菌surfactin产量的启动子置换方法

摘要

本发明涉及一种提高枯草芽孢杆菌surfactin产量的启动子置换方法，属于生物技术领域。采用DNA同源整合技术使启动子Pspac置换枯草芽孢杆菌fmbR surfactin合成酶基因本身的启动子。通过PCR方法从fmbR菌株基因组中扩增得到1081bp的同源序列，连接到质粒pMUTIN4的HindIII和BamH I酶切位点上，并将构建好的载体转化到野生枯草芽孢杆菌fmbR中，经过抗生素培养基筛选并通过分子生物学方法鉴定获得。本发明方法可以直接从遗传上改良抗菌肽生产菌株，在工业上具潜在的应用价值。菌株surfactin产量提高约4.85倍，在IPTG诱导下，surfactin产量约提高10倍。

主权项

1.一种提高枯草芽孢杆菌surfactin产量的启动子置换方法，是通过克隆野生型枯草芽孢杆菌基因组DNA的surfactin的一个合成酶srfA-A基因5’端带有启动子Psrf的同源片段，其序列为SEQIDNO.1，大小1081bp，并将该片段连接到带有启动子Pspacp的MUTIN4载体上，然后转化枯草芽孢杆菌，获得surfactin产量提高的菌株。