耐高温α-淀粉酶生产工艺

摘要

本发明属生物工程酶制剂技术领域，公开了一种耐高温α-淀粉酶的生产方法。该生产方法采用地衣芽孢杆菌为菌株，以玉米为碳源、氮源，通过一级种子罐发酵、大罐补料分批发酵、精滤、杀菌处理生产出耐高温、高活性α-淀粉酶。发酵单位最高达到13480u/ml，平均发酵产酶水平12360u/ml，较工艺优化前的发酵水平7982u/ml提高54.5％；每标吨酶消耗淀粉量19.8kg，较分批发酵24.8kg减少5kg，形成了一套完整的耐高温α-淀粉酶发酵补料工艺，实现了耐高温α-淀粉酶工业化规模生产。

主权项

1.耐高温α-淀粉酶生产工艺，采用地衣芽孢杆菌为菌株，通过一级种子罐发酵、大罐发酵、过滤、成品处理制得，其特征在于，通过如下步骤实现：(1)选取菌种：采用地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)；(2)、1.5吨种子罐发酵，培养基配方：玉米淀粉6％～10％，玉米浆1％～3％，豆粕2％～5％，磷酸二氢钾0.3％～0.6％，磷酸氢二钾0.5％～2％，柠檬酸钠0.1％～0.3％，余量为水，各组分以重量百分比计；加高温淀粉酶液化，消后pH6.2—6.5；用茄子瓶接入种母，温度37±1℃，通风量25-40m³/h，pH值6.4，培养时间24-36小时；(3)、35吨发酵罐发酵，培养基配方：玉米淀粉15％～30％，玉米粉5％～10％，豆粕1％～8％，玉米浆2％～5％，磷酸二氢钾0.1％～0.8％，磷酸氢二钾0.8％～2％，柠檬酸钠0.05％～0.4％，余量为水，各组分以重量百分比计；加高温淀粉酶液化，pH6.2—6.4；温度42±1℃，风量400—1000m³/h，pH值6.4—6.8，培养时间80—100小时；在上述条件下补料分批发酵：以淀粉浓度为150～280g/L为发酵初糖浓度，以质量百分比40％～70％的淀粉糖溶液作为发酵补料物，在DE值降至10～60mg/ml时以阀门开启程度的大小为依据开始持续流加补料，维持发酵液中DE值约为10～60mg/ml，控制总糖浓度达到220～320g/L时停止补料；(4)、提取浓缩工艺：经絮凝、压滤，二次过滤后，采用超滤膜浓缩，保持料液浓缩过程中温度20℃--45℃；最后采用精滤板框过滤机，配合硅藻土预涂工艺进行过滤除菌，最终生产出成品。