发明名称 一种扇贝酚氧化酶的分离纯化方法
摘要 本发明公开了一种扇贝酚氧化酶的分离纯化方法,其特征在于它包括以下步骤:(1)从扇贝的闭壳肌获得血淋巴,经离心、重悬、破碎后离心取上清,获得血细胞破碎液上清;(2)以血细胞破碎液上清为样品进行连续梯度非变性电泳;(3)以特异性底物发色法定位非变性电泳的酚氧化酶蛋白带;(4)对目的带进行切胶,通过电洗脱法回收酚氧化酶蛋白带,经透析冻干后得到提纯的扇贝酚氧化酶蛋白。本发明的优点在于:①提纯时间短;②操作简便,设备要求简单,成本低,且大大减少了对样品的处理步骤;③提纯的样品纯度高,通过非变性与变性电泳检测只呈现一条带,并且很好的保持了酶的生物活性,提高了提纯效率。
申请公布号 CN101899425A 申请公布日期 2010.12.01
申请号 CN201010191335.8 申请日期 2010.06.03
申请人 中国海洋大学 发明人 邢婧;蒋经伟;战文斌;绳秀珍
分类号 C12N9/02(2006.01)I 主分类号 C12N9/02(2006.01)I
代理机构 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 代理人 王铎
主权项 一种扇贝酚氧化酶的分离纯化方法,其特征在于它包括以下步骤:(1)从扇贝的闭壳肌获得血淋巴,经离心、重悬、破碎后离心取上清,获得血细胞破碎液上清;(2)以血细胞破碎液上清为样品进行连续梯度非变性电泳;(3)以特异性底物发色法定位非变性电泳的酚氧化酶蛋白带;(4)对目的带进行切胶,通过电洗脱法回收酚氧化酶蛋白带,经透析冻干后得到提纯的扇贝酚氧化酶蛋白。
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