发明名称 |
表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建 |
摘要 |
本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建,其特征在于:首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒,并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞,在表达Cre重组酶的情况下,将转入到细胞中的载体pEF-stop-eGFP中的Loxp卯定的终止子删除,使后接的报告基因eGFP得以表达,从而用于剪切条件性表达绿色荧光蛋白载体中的LoxP元件;其应用基因工程技术构建了一个表达Cre重组酶的质粒,并且重组质粒pCEP4-Cre可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在,并在撤去药物压力后以每代10%的速率丢失;可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变;其使用的简便性和安全性可被广泛的应用,为人类Cre重组酶系统的检测发展起到积极的推动作用。 |
申请公布号 |
CN101892257A |
申请公布日期 |
2010.11.24 |
申请号 |
CN201010185086.1 |
申请日期 |
2010.05.28 |
申请人 |
吉林大学 |
发明人 |
逄大欣;周杨;欧阳红生;朱建国;张明军;王铁东;李莉;聂代邦;段新平;毛丹 |
分类号 |
C12N15/63(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/63(2006.01)I |
代理机构 |
吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 |
代理人 |
王薇 |
主权项 |
一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4‑Cre的序列SEO ID NO:1。 |
地址 |
130062 吉林省长春市西安大路5333号吉林大学畜牧兽医学院 |