快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法

摘要

本发明公开了一种快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法，本发明方法是根据烟草野火菌和角斑菌菌株的hrpZ全序列，角斑菌株hrpZSeq ID 002，所设计的序列特异性寡核苷酸PCR扩增引物对，以及野火毒素生物合成必需基因的特异性寡核苷酸PCR扩增引物对，即Seq ID 005、Seq ID 006等；利用上述引物对和Taq DNA聚合酶，进行PCR扩增，根据电泳结果即可于2～5小时内快速鉴定出烟草野火病菌和角斑病菌。与传统的细菌鉴定方法相比，不仅方便、快捷，而且准确、可靠、特异性强。

主权项

一种快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法，其特征在于：本发明方法是根据中国菌株的野火菌株hrpZ Seq ID 001和角斑菌株hrpZ SeqID 002，所设计的序列特异性寡核苷酸PCR扩增引物对Seq ID 003、Seq ID 004，以及野火毒素生物合成必需基因TabA的特异性寡核苷酸PCR扩增引物对SeqID 005、Seq ID 006；利用上述引物对和Taq DNA聚合酶，以细菌基因组DNA50～400ng或菌落或经热激处理的病斑组织浸提液为模板，进行PCR扩增，反应体系20～50ul；PCR产物用0.5～1.4％的琼脂糖凝胶电泳检查，根据电泳结果即可于2～5小时内快速鉴定出烟草野火病菌和角斑病菌。