| 发明名称 | 利用迷你内含子蛋白介导人胰高血糖素样肽(GLP-1)的制备 | ||
| 摘要 | 本发明利用微型蛋白内含子制备胰高血糖素样肽-1。Ssp DnaB蛋白质内含子(intein)其N-末端的106个氨基酸(inteinN)和C-末端的48个氨基酸(intein C)，形成的Ssp DanB微型蛋白质内含子具有完整的剪接功能。将intein C与胰高血糖素样肽-1融合蛋白(inteinC-GLP)在大肠杆菌内进行表达，intein N在大肠杆菌中进行表达，并以Ni-Sepharose进行纯化。纯化后的inteinC-GLP与intein N在pH6.2的磷酸盐缓冲体系中进行拼接，释放出重组胰高血糖素样肽-1。拼接产物上样于Ni-Sepharose，GLP-1存在于穿过液中，其它蛋白被吸附于Ni-Sepharose柱上。将GLP-1粗品进一步浓缩纯化得到纯品，MALDI-TOF质谱分析，与理论分子量相符合。葡萄糖耐受实验结果证明，与对照相比GLP-1(7-36)能有效降低小鼠血糖水平。 | ||
| 申请公布号 | CN101886105A | 申请公布日期 | 2010.11.17 |
| 申请号 | CN200910026562.2 | 申请日期 | 2009.05.12 |
| 申请人 | 南京大学 | 发明人 | 刘建宁;孙自勇;蒋爱芹 |
| 分类号 | C12P21/02(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C07K14/605(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 主分类号 | C12P21/02(2006.01)I |
| 代理机构 | 代理人 | ||
| 主权项 | 通过迷你内含子蛋白(intein)介导胰高血糖素样肽的制备。 | ||
| 地址 | 210093 江苏省南京市汉口路22号 | ||