发明名称 |
一种从血块中快速提取基因组DNA的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种从血块中快速提取基因组DNA的方法。本发明的方法包括如下步骤:(1)将血块在2-20牛顿压力下进行过滤,过滤孔径为40-130目,收集滤出液;(2)将滤出液与红细胞裂解液混匀后静置4-6分钟,9,000-13,000g离心0.5-1.5分钟,取沉淀;(3)将沉淀与细胞裂解液混匀后63-67℃水浴8-12分钟,9,000-13,000g离心0.5-1.5分钟,取上清;(4)将上清与异丙醇混匀,用DNA结合柱进行纯化,得到基因组DNA。本发明的方法具有以下优点:DNA提取量和纯度都显著提高;纯化步骤大大简化,节省大量时间;不使用任何有毒溶剂,保证工作人员的健康安全;使用廉价一次性物品,在降低成本的同时,避免潜在的交叉污染。本发明适于推广应用。 |
申请公布号 |
CN101886071A |
申请公布日期 |
2010.11.17 |
申请号 |
CN201010210713.2 |
申请日期 |
2010.06.18 |
申请人 |
北京市结核病胸部肿瘤研究所 |
发明人 |
车南颖;李传友;李松;张旭霞 |
分类号 |
C12N15/10(2006.01)I;C12N5/07(2010.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 |
北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 |
代理人 |
关畅;任凤华 |
主权项 |
从血块中提取基因组DNA的方法,包括如下步骤:(1)将血块在2-20牛顿压力下进行过滤,过滤孔径为40-130目,收集滤出液;(2)将滤出液与红细胞裂解液混匀后静置4-6分钟,然后9,000-13,000g离心0.5-1.5分钟,取沉淀;(3)将沉淀与细胞裂解液混匀后63-67℃水浴8-12分钟,然后9,000-13,000g离心0.5-1.5分钟,取上清;(4)将上清与异丙醇混匀后,用DNA结合柱进行纯化,得到基因组DNA。 |
地址 |
101149 北京市通州区马厂97号北京胸科医院细菌免疫室 |