主权项 |
一种以鱼肠为原料制备小口径人工血管的方法,其特征在于,依次通过下列步骤实现:(1)鱼肠的准备:取新鲜鱼肠,剔除筋膜和脂肪,去除鱼肠内容物,洗净;(2)鱼肠的去细胞处理:将步骤(1)所得的鱼肠依次进行脱脂,漂洗,酶处理,漂洗,去垢剂处理,漂洗,冷冻干燥;脱脂:将鱼肠浸泡在肥皂水中,每隔1小时搅动10分钟,如此反复操作12次;漂洗:捞出鱼肠,包裹于纱布中,置于水龙头下,流水冲洗8小时;胰蛋白酶处理:将鱼肠浸泡于浓度为2.5g/L的胰蛋白酶溶液中,8小时;复合酶处理:将鱼肠浸泡于含30U/ml DNA酶和0.025mg/ml RNA酶的溶液中,4小时;漂洗:捞出鱼肠,包裹于纱布中,置于水龙头下,流水冲洗2小时;去垢剂处理:将鱼肠浸泡于浓度为20g/L的TrisHcl和v/v浓度为1%Triton X-100的溶液中,12小时;漂洗:捞出鱼肠,包裹于纱布中,置于水龙头下,流水冲洗12小时,磷酸盐缓冲溶液漂洗3次,每次12小时;冷冻干燥:将鱼肠套在圆柱体模具上,冷冻干燥,得鱼肠来源的细胞外基质;(3)小口径人工血管的制备:将步骤(2)所得鱼肠来源的细胞外基质置于浓度为10~50g/L的PLGA三氯甲烷溶液中浸泡1小时,取出后自然风干,磷酸盐缓冲溶液漂洗3次,每次1小时,冷冻干燥,密封保存。 |