诱导胚状体形成和植物再生的植物双元表达载体及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种诱导胚状体形成和植物再生的植物双元表达载体，包含BBM基因和FLP-FRT位点特异性重组系统，FLP-FRT位点特异性重组系统包含FLP基因和两个同向FRT位点，BBM基因和FLP基因位于两个同向FRT位点之间，BBM基因由组成型启动子控制，FLP基因由诱导型启动子控制；还公开了构建该植物双元表达载体的方法及利用该植物双元表达载体诱导胚状体形成和植物再生的方法；本发明不仅可以促进植物愈伤组织形成胚状体，再诱导形成转基因植株，显著提高植物的转化频率和再生频率，而且可以消除外源基因对转基因植株的负面影响，为难以进行遗传转化的植物品种提供了一种新的遗传转化策略，具有广阔的应用前景。

主权项

诱导胚状体形成和植物再生的植物双元表达载体，其特征在于：所述植物双元表达载体为pLFFLPBBM，所述pLFFLPBBM是在载体pBIN19的EcoRI和NheI酶切位点之间插入BBM基因和FLP-FRT位点特异性重组系统，所述FLP-FRT位点特异性重组系统包含FLP基因和两个同向FRT位点，所述BBM基因和FLP基因位于两个同向FRT位点之间且BBM基因位于FLP基因的下游，所述BBM基因由花椰菜花叶病毒35S启动子和NOS终止子启动和终止转录，所述FLP基因由热激启动子HSP18.2和NOS终止子启动和终止转录。