乙型肝炎病毒颗粒的分离纯化方法

摘要

本发明公开了乙型肝炎病毒颗粒的分离纯化方法，是将乙型肝炎病毒DNA阳性血清以70000g进行不连续蔗糖密度梯度(60％、45％、35％、25％、15％)离心5小时，再自离心管底部分段吸取离心液并分别收集到不同的容器内，合并呈无色透明的各份收集液，超滤离心去除蔗糖，即得乙型肝炎病毒颗粒；本发明方法可以短时、高效地分离纯化乙型肝炎病毒颗粒，病毒颗粒收获率高，所得病毒颗粒具有典型的乙型肝炎病毒特征和良好的生物学感染活性，可以有效感染树鼩原代肝细胞。

主权项

乙型肝炎病毒颗粒的分离纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：a、取乙型肝炎病毒DNA阳性血清，离心去除血清中的血浆蛋白，取上清液，再离心去除血清中的脂肪，取上清液，备用；b、在离心管中，自下而上依次加入质量分数为60％、45％、35％、25％和15％的蔗糖溶液以及步骤a所得乙型肝炎病毒DNA阳性血清上清液，在温度为4～10℃的条件下，70000g离心5小时，离心后，自离心管底部分段吸取离心液并分别收集到不同的容器内，至收集液呈淡黄色时停止吸取和收集；c、合并步骤b所得呈无色透明的各份收集液，用TNE缓冲液稀释后，超滤离心去除蔗糖，再用TNE缓冲液充分洗涤，收集超滤液，即得乙型肝炎病毒颗粒。