βⅢ-微管蛋白基因检测试剂盒及应用

摘要

一种βIII-微管蛋白基因检测试剂盒，由盒体1、衬垫2，染料法(SYBRGreen I染料)PCR反应液3、Taq酶4、标准品5、阴性对照6、阳性对照7组成。本发明试剂盒不仅保持了PCR的高灵敏性，避免了非特异性的扩增，而且使得被检测基因的特异性大大提高。本发明与探针法相比较，不需要设计荧光探针，使用方便且成本低。本发明设计合理，可在检测长春瑞宾敏感性相关基因βIII-微管蛋白中应用。

主权项

一种βIII-微管蛋白基因检测试剂盒，由盒体(1)、衬垫(2)、染料法PCR反应液(3)、Taq酶(4)、标准品(5)、阴性对照(6)、阳性对照(7)组成，衬垫(2)上设有容器孔，分别放置染料法PCR反应液(3)、Taq酶(4)、标准品(5)、阴性对照(6)、阳性对照(7)，染料法PCR反应液(3)由PCR缓冲液、SYBR Green Ⅰ染料、MgCl2、dNTPs、检测用引物组成，其中βIII-微管蛋白引物序列为：βIII-tubuin-F ACAGCAGCTACTTCGTGGAGTGGATCβIII-tubuin-R GTCTTCGTACATCTCGCCCTCTTCC3-磷酸甘油醛脱氢酶引物序列为：GAPDH-F GAAGGTGAAGGTCGGAGTCGAPDH-R GAAGATGGTGATGGGATTTCβIII-微管蛋白标准品序列为：a cagcagctac ttcgtggagt ggatccccaa caacgtgaag gtggccgtgt gtgacatccc gccccgcggcctcaagatgt cctccacctt catcgggaac agcacggcca tccaggagct gttcaagcgcatctccgagc agttcacggc catgttccgg cgcaaggcct tcctgcactg gtacacgggc gagggcatggacgagatgga gttcaccgag gccgagagca acatgaacga cctggtgtcc gagtaccagc agtaccaggacgccacggcc gaggaagagg gcgagatgta cgaagac3-磷酸甘油醛脱氢酶标准品序列为：gaa ggtgaaggtc ggagtcaacg gatttggtcg tattgggcgc ctggtcacca gggctgcttttaactctggt aaagtggata ttgttgccat caatgacccc ttcattgacc tcaactacat ggtttacatgttccaatatg attccaccca tggcaaattc catggcaccg tcaaggctga gaacgggaag cttgtcatcaatggaaatcc catcaccatc ttc阴性对照(6)为无βIII-微管蛋白表达的cDNA样本，阳性对照(7)为有βIII-微管蛋白表达的cDNA样本，标准品含有βIII-微管蛋白基因和GAPDH基因。