主权项 |
花叶蒲苇的组织培养方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)无菌材料的获得春季取萌发的幼嫩的芽,去除外面包裹的叶片后,用自来水冲洗1-3h后于超净工作台上,依次利用质量浓度为70-75%的乙醇浸泡10-50s,体积浓度为0.5-2‰的汞浸泡10-30min,再用无菌水冲洗4-6次,利用无菌滤纸吸干表面的水分后,再切成0.5-2cm长的带腋芽的节段,节段接种于腋芽诱导培养基上;(2)芽的分化和增殖节段接种于腋芽诱导培养基上1-3周后,腋芽部位开始膨大,出现绿色突起,3-5周后可见芽分生组织,再培养1-2个月,小的不定芽可以长到3-4cm,将不定芽切下转入不定芽增殖培养基中进行增殖培养,不定芽基部的愈伤组织较多,但不影响增殖,不定芽生长迅速且无玻璃化等不良现象,在培养基中生长发育良好;(3)不定芽壮苗培养在不定芽增殖培养基上,诱导出的丛生芽中每丛有2-3株能够伸长,其余的处于矮化状态,将丛生芽分成小丛后,转至壮苗培养基上生长,不定芽迅速伸长,15-30天后可以长到3-4cm;(4)生根培养取3-4cm的不定芽小植株,转接入生根培养基中诱导生根,5-15天后幼苗基部分化出白色的根原基,25-40天后可以长至4-6cm,根系粗壮,须根众多,生根率为90-100%;(5)炼苗与移栽生根培养15-30天,根系长至0.5-1cm时,选择根系发达、生长健壮的无菌苗,于室内开瓶炼苗2-4天,然后将苗取出,洗净根部的琼脂,栽于温室内的苗床中驯化20-40天,即可移栽室外,给予肥水管理,最终的移栽成活率为90-100%。 |