发明名称 一种土党参组培快繁方法
摘要 本发明公开了一种土党参组培快繁方法,包括:1)外植体的选取与预处理;2)外植体灭菌;3)诱导培养;4)增殖培养;5)生根培养;6)移栽。其中,基本培养基和各阶段培养基中添加物的含量为:(1)基本培养基:选用MS基本培养基,蔗糖或白糖20~30g/L,琼脂7~9g/L,pH5.6~5.8;(2)诱导培养基:MS+细胞分裂素0.1~5.0mg/L+生长素0.0~0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;(3)增殖培养基:MS+细胞分裂素0.1~3.0mg/L+生长素0.0~0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;(4)生根培养基:1/2MS+生长素0.1~1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L。本发明的有益效果是:简便易行,培养基成分配方针对性强,组培苗玻璃化率低,操作可行,能有效地使土党参较野生的繁殖率高,遗传稳定性好。
申请公布号 CN101869074A 申请公布日期 2010.10.27
申请号 CN201010166822.9 申请日期 2010.05.06
申请人 浙江省农业科学院 发明人 徐刚;陈剑平;汪一婷;吕永平;牟豪杰
分类号 A01H4/00(2006.01)I;A01G31/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 代理人 陈继亮
主权项 一种土党参组培快繁方法,其特征在于:该方法按以下步骤进行:1)、外植体的选取与预处理:从土党参植株上剪取长5~10cm的新萌发的嫩枝,剪去叶片,用加有1%体积比洗洁精的自来水中漂洗10~30分钟后,用自来水冲洗20~40分钟;2)、外植体灭菌:将预处理后的嫩枝切成长1~2cm的带顶芽的茎段或带腋芽的茎段作为外植体,经表面灭菌处理后备用;3)、诱导培养:在无菌条件下将经表面灭菌后的带顶芽的茎段或带腋芽的茎段外植体的一端或二端切口变褐处切除后,顶芽和带腋芽茎段的芽向上接种在诱导培养基中,在培养条件下培养30~45天后,诱导顶芽和腋芽萌芽,然后诱导出丛生芽并抽长成藤条;4)、增殖培养:在无菌条件下将藤条切成一节一节接入增殖培养基中进行增殖培养,在培养条件下培养30~45天诱导出丛生芽并抽长成藤条;根据对幼苗数量的需求,每隔30~45天按同样方法进行组培苗再增殖培养;5)、生根培养:将藤条切成一节一节后,接种在生根培养基中进行生根培养,在培养条件下培养20~30天后,藤条抽长成5~7cm、苗基部长出3~5根细根;6)、移栽:将生根组培苗移栽于穴盘内的育苗袋中,培育1~2个月至成苗;其中,基本培养基和各阶段培养基中添加物的含量为:(1)基本培养基:选用MS基本培养基,蔗糖或白糖20~30g/L,琼脂7~9g/L,pH5.6~5.8;(2)诱导培养基:MS+细胞分裂素0.1~5.0mg/L+生长素0.0~0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;(3)增殖培养基:MS+细胞分裂素0.1~3.0mg/L+生长素0.0~0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;(4)生根培养基:1/2MS+生长素0.1~1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L;所述的细胞分裂素为BA或KT,生长素为NAA或IAA或IBA。
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