发明名称 | 一种变构酸的制备方法 | ||
摘要 | 本发明提供一种变构酸的制备方法,将变构霉素溶解于0.1-0.5M的缓冲液A中,配制成变构霉素溶液,再将脂肪酶溶解于缓冲液B中,配制酶液;将酶液加入到变构霉素溶液中,于25-40℃下反应0.5-5.0h,反应结束,将反应液pH调至4.0,用等体积的萃取溶剂A萃取;取水层将pH调至2.0并用等体积的萃取溶剂B萃取,取有机层,用饱和盐水洗涤后再用Na2SO4干燥,真空蒸馏浓缩溶剂,得到变构酸粗品;将所述变构酸的粗品再以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂,取含变构酸的柱层析产品用丙酮重结晶,得到变构酸产品。本发明利用脂肪酶对发酵的变构霉素进行水解,获得变构酸,具有反应条件温和、反应专一、高效等优点。 | ||
申请公布号 | CN101864467A | 申请公布日期 | 2010.10.20 |
申请号 | CN201010178819.9 | 申请日期 | 2010.05.21 |
申请人 | 浙江工业大学 | 发明人 | 陈小龙;黄振;芮云峰;范永仙;嘉晓勤 |
分类号 | C12P17/04(2006.01)I | 主分类号 | C12P17/04(2006.01)I |
代理机构 | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人 | 黄美娟;王兵 |
主权项 | 1.一种如式(I)所示的变构酸的制备方法,其特征在于所述方法包括如下步骤:将变构霉素溶解于0.1-0.5M的缓冲液A中,配制成浓度为5000-50000μg/mL的变构霉素溶液,再将脂肪酶溶解于0.1-0.5M的缓冲液B中,配制成浓度为100-500U/mL的酶液;将酶液加入到变构霉素溶液中,并且变构霉素与脂肪酶活力之比为500-5000μg/U,于25-40℃下反应0.5-5.0h,反应结束,将反应液pH调至4.0,用等体积的萃取溶剂A萃取,分离出萃液层和水层;取水层将pH调至2.0并用等体积的萃取溶剂B萃取,取有机层,用饱和盐水洗涤后再用Na<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>干燥,真空蒸馏浓缩溶剂,得到变构酸粗品;将所述变构酸的粗品再以乙酸和二氯甲烷溶剂为梯度洗脱的洗脱剂,经硅胶柱进行梯度洗脱,将收集到的洗脱液分别进行薄层层析,取含变构酸的柱层析产品,将得到的含变构酸的柱层析产品合并用丙酮重结晶,得到如式(I)所示的变构酸产品,<img file="FDA0000021593990000011.GIF" wi="559" he="274" /> | ||
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