窿缘桉组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明所述窿缘桉组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：选择优良树体作为外植体，对外植体进行采集、消毒；对茎段的初始培养、增殖培养、生根培养；炼苗、出瓶移栽和苗木管理。采用本发明可以提高增殖系数3～5。窿缘桉种苗遗传性状稳定，窿缘桉种苗达到良种化和无性系化，增加了单位面积的木材产量，提高了窿缘桉林分的生态效益和经济效益。

主权项

窿缘桉组织培养快速繁殖方法，其特征在于该繁殖方法包括以下步骤：1.1优良个体选择选择窿缘桉实生林内单株桉叶油中桉叶素含量为60％以上的无病虫害个体为优树；1.2外植体的采集、消毒在优树离地面约30cm处进行环割树周长的2/3，割伤至韧皮部，待萌芽条生长至30～40cm时采集接种，将采回的枝条去除叶片后，用清水冲洗，再用沾有肥皂粉或洗洁精的软毛刷进行刷洗，后用去离子水清洗1～3次，将材料分成茎尖和茎段，用75％乙醇浸泡灭菌30s，蒸馏水冲洗1～3次后置于超净台，再用0.1％HgCl2静置浸泡2～6min，用无菌水冲洗1～2次；然后再倒入0.1％HgCl2，以振荡的方式进行灭菌处理3～6min，最后用无菌水冲洗5～8次；1.3茎段的初始培养、增殖培养、生根培养将消毒好的茎段接种到改良MS+6-BA0.1～0.5mg·L-1+蔗糖30000mg·L-1+琼脂3000mg·L-1的培养基上进行诱导培养，培养条件为25±2℃，1000～1500LX，每天光照10～14h为宜，30d后将密集的小丛生芽分割为单株或丛芽小束，转接到改良MS+6-BA 1.5mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1+蔗糖30000mg·L-1+琼脂3000mg·L-1的增殖培养基上，以促进培养物的腋芽和侧芽萌发；将丛生芽中株高2～3cm的单芽剪下，接种到生根培养基中诱导生根；所述生根培养基的组成为：1/2改良MSIAA                    1.5mg·L-1NAA                    1mg·L-1蔗糖                   30000mg·L-1琼脂粉                 3800mg·L-1所述改良MS培养基的组成为：KNO3                   1900mg·L-1NH4NO3                 1600mg·L-1CaCl2.2H2O             460mg·L-1MgSO4.7H2O             370mg·L-1Ca(NO3)2.4H2O          200mg·L-1KH2PO3                 170mg·L-1MnSO4.4H2O             22.3mg·L-1ZnSO4.7H2O             8.6mg·L-1CuSO4.5H2O             0.025mg·L-1H3BO3                  6.2mg·L-1Na2MoO4.2 H2O          0.25mg·L-1KI                     0.83mg·L-1CoCl2.6 H2O            0.025mg·L-1维生素B1               0.4mg·L-1维生素B6               0.5mg·L-1烟酸                   0.5mg·L-1甘氨酸              2.0mg·L-1肌醇                50mg·L-11.4炼苗、出瓶移栽单芽生根长0.5～1.0cm时，把生根苗搬出培养室，移至大棚炼苗10～30d，苗高2.0～4.0cm，根长1.5～2.0cm时，移栽到红心土、木屑和泥炭土等混合的轻型基质中；1.5苗木管理移栽一周后，喷施0.1％的复合肥溶液，每周1～2次，10～15d后，搬到自然条件的网室培育，苗高15～35cm，地茎0.18～0.25cm可出圃造林。