发明名称 皂角苷分解酶,其基因及大豆皂醇B的大量生产系统
摘要
申请公布号 TWI331630 申请公布日期 2010.10.11
申请号 TW095129680 申请日期 2002.06.06
申请人 明治制菓股份有限公司 发明人 渡边学;御堂直树;田村隆由;隅田奈绪美;矢口贵志
分类号 C12N15/56 主分类号 C12N15/56
代理机构 代理人 林志刚 台北市中山区南京东路2段125号7楼
主权项 一种经分离之蛋白质,其特征为选自下述所成群的蛋白质;(a)选自序列号码2所示胺基酸序列所成的蛋白质、及(b)对于前述(a)胺基酸序列之蛋白质而言,至少具有90外相同性之胺基酸序列,且具有皂角苷分解活性之蛋白质。一种经分离之聚核苷酸,其特征为编码如申请专利范围第1项之蛋白质。一种经分离之聚核苷酸,其特征为选自下述所成群之聚核苷酸:(i)含有选自序列号码1所示硷基序列所成的聚核苷酸、(ii)对于前述(i)硷基序列所成之聚核苷酸而言,具有至少90%相同性之硷基序列所成,且编码具有皂角苷分解活性之蛋白质之聚核苷酸、及(iii)与前述(i)的硷基序列所成之聚核苷酸,于严谨条件为使用添加0.4% SDS及6M尿素之0.5倍浓度SSC,于42℃下洗净之严谨条件下进行杂交,且编码具有皂角苷分解活性之蛋白质之聚核苷酸。如申请专利范围第2项或第3项之经分离之聚核苷酸,其来自丝状菌。如申请专利范围第4项之经分离之聚核苷酸,其中丝状菌为Neocosmospara属。如申请专利范围第5项之经分离之聚核苷酸,其中Neocosmospara属为Neocosmospara vasinfecta var.vasinfecta PF1225株(寄存号码CCRC 930058)或其突变株。一种重组载体,其特征为含有如申请专利范围第2项至第6项中任一项之经分离之聚核苷酸所成。一种宿主,其特征为经由如申请专利范围第7项之重组载体进行转形者。如申请专利范围第8项之宿主,其为微生物。如申请专利范围第9项之宿主,其为丝状菌。如申请专利范围第10项之宿主,其中丝状菌为Trichoderma属。如申请专利范围第11项之宿主,其中Trichoderma属为Trichoderma viride MC300-1株(寄存号码为CCRC 930056)或其突变株。如申请专利范围第8项至第12项中任一项之宿主,其可表现皂角苷分解酶。一种目的蛋白质的制造方法,其特征为培养如申请专利范围第8项至第13项中任一项之宿主,所得之培养物中采出具有皂角苷分解活性之蛋白质者。一种大豆皂醇B的制造方法,其特征为含有,使用含有可由申请专利范围第8项第13项中任一项之宿主得到之具有皂角苷分解活性的蛋白质之培养物,进行大豆皂醇B作为配基的配糖体之分解者。一种大豆皂醇B的制造方法,其特征为含有,使用至少一种选自如申请专利范围第1项之蛋白质、及可由如申请专利范围第8项至第13项中任一项之宿主所得之蛋白质所成群之蛋白质,进行大豆皂醇B作为配基的配糖体之分解者。
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