| 摘要 |
1. Способ получения фосфолипазы, который включает процессинг экспрессированного грибного пептида, так что достигается отщепление пептида от С-терминального конца и/или пептида от N-терминального конца с образованием корового пептида, обладающего фосфолипазной активностью, где указанный коровый пептид включает: ! а) аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 146-153 в SEQ ID NO: 1, аминокислотами 87-94 в SEQ ID NO: 3, или аминокислотами 79-86 в SEQ ID NO: 12; или последовательность, идентичную любой из указанных аминокислотных последовательностей, за исключением замещения одной аминокислоты другой аминокислотой; и ! b) по меньшей мере два цистеиновых остатка, расположенных на N-концевом участке последовательности, приведенной в а); и ! с) по меньшей мере два цистеиновых остатка, расположенных на С-концевом участке последовательности, приведенной в а). ! 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что экспрессированный пептид экспрессируется в клетке-хозяине нитевидного гриба, трансформированной ДНК, кодирующей экспрессированный пептид. ! 3. Способ по п.2, отличающийся тем, что клетка-хозяин представляет собой Aspergillus, Fusarium или Trichoderma, предпочтиетльно A. oryzae, A. niger, F. venenatum или T. reesei. ! 4. Способ по п.2, отличающийся тем, что экспрессированный пептид подвергается процессированию in vivo в клетке-хозяине. ! 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что коровый пептид имеет длину из 100-150 аминокислот. ! 6. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная фосфолипаза обладает удельной фосфолипазной активностью, которая по меньшей мере в два раза превышает активность экспрессированного пептида до процессинга. ! 7. Способ по п.1, отличающийся тем, что эксп� |
