免疫层析法检测试剂及其制作方法

摘要

本发明公开了一种免疫层析法检测试剂及其制作方法。免疫层析法检测试剂包括PVC片材，PVC片材上依次设有加样区、第一反应区、第二反应区和吸水区，加样区为玻璃纤维层，第一反应区为聚酯膜，第二反应区为硝酸纤维素膜，吸水区为吸水滤纸，聚酯膜上设有至少两种乳胶抗体结合物，不同的乳胶抗体结合物上标记有不同的颜色；硝酸纤维素膜上设有多种与聚酯膜上的乳胶抗体结合物中的抗体相同的抗体以及一种抗原，多种抗体及抗原分别呈带状并且相互平行设置在硝酸纤维素膜上。免疫层析法检测试剂的制作方法包括用彩色乳胶标记抗体、点膜、点乳胶和组装四个步骤。因此本发明能够同时检测多个物质，并通过不同的颜色显示出来。

主权项

一种免疫层析法检测试剂的制作方法，包括以下步骤：1).用至少两种颜色的直径为200-500nm的聚苯乙烯胶体颗粒作为彩色乳胶颗粒分别标记至少两种抗体：a，用0.01M PH7.4的PBS把彩色乳胶颗粒稀释成1％的终浓度(质量百分比)，再加入抗体或抗原使其终浓度为0.1mg/ml；b，将上述溶液置于4℃反应并且过夜；c，向步骤b所获得的溶液中加入终浓度为1％的BSA并封闭1小时；d，将步骤c中的溶液进行离心，得到乳胶抗体结合物的沉淀物；e，将步骤d中的沉淀物用含0.1％BSA的0.01M PH7.4的PBS复溶，复溶后的浓度为1％(质量百分比)，并置于4℃以备用；2).点膜：用0.01M PH7.4的PBS分别将一种抗原和至少一种抗体稀释，所述抗原是特异性针对步骤1)中所述至少两种抗体中的一个抗体的抗原，步骤1)中剩下的抗体与步骤2)中所述至少一种抗体相同；稀释后的浓度为至0.5-3.0mg/ml，用点膜机将每种抗体以及抗原的稀释液分别点在硝酸纤维素膜上的不同区域，然后将硝酸纤维素膜置于37℃的温度下烘干2小时，密封好并置于室温备用；3).点乳胶：用含0.1％BSA的0.01M PH7.4的PBS将步骤1)步中标记好的乳胶抗体结合物稀释，稀释后的浓度为0.2％-0.6％(质量百分比)，用点乳胶机喷点在聚酯膜上，然后将聚酯膜置于37℃的温度下烘干2小时，密封好并置于室温备用；4).组装：将玻璃纤维、点好的聚酯膜、点好的硝酸纤维素膜和吸水滤纸分别按顺序粘贴在PVC片材上；