发明名称 一种苯酚羟化酶基因工程菌转化吲哚制备靛蓝的方法
摘要 本发明属于生物工程技术领域,涉及将苯酚羟化酶基因重组于大肠杆菌体内形成工程菌,用于转化吲哚制备靛蓝的方法。通过获取GenBank注册号为EU339930的高效苯酚降解菌Arthrobacter sp.W1中总长为5490bp、Genbank注册号为FJ610336的苯酚羟化酶基因全长序列,连接至载体质粒(pET28a(+)Vector),并转化至宿主细胞大肠杆菌中构建苯酚羟化酶基因工程菌;生物转化反应液中苯酚羟化酶基因工程菌全细胞干重浓度为1~2g/L,吲哚浓度为100~600mg/L,葡萄糖浓度为0.5~2mmol/L,在20~40℃温度下,控制摇床转速在50~200r/min,振荡反应2~14小时。本发明的生物转化方法反应条件温和,产物浓度高,生产周期短,适合工业生产。
申请公布号 CN101851649A 申请公布日期 2010.10.06
申请号 CN201010161539.7 申请日期 2010.04.28
申请人 大连理工大学 发明人 曲媛媛;李慧;周集体;时胜男;项学敏;乔森;吕红;张爱丽
分类号 C12P17/16(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12P17/16(2006.01)I
代理机构 大连智慧专利事务所 21215 代理人 潘迅
主权项 一种苯酚羟化酶基因工程菌转化吲哚制备靛蓝的方法,其特征在于,苯酚羟化酶基因工程菌是通过获取GenBank注册号为EU339930的高效苯酚降解菌Arthrobacter sp.W1中总长为5490bp、Genbank注册号为FJ610336的苯酚羟化酶基因全长序列,连接至载体质粒(pET28a(+)Vector),并转化至宿主细胞大肠杆菌中构建的;生物转化反应时,反应液中苯酚羟化酶基因工程菌全细胞干重浓度为1~2g/L,吲哚浓度为100~600mg/L,葡萄糖浓度为0.5~2mmol/L,在20~40℃温度下,摇床转速为50~200r/min,振荡反应2~14小时。
地址 116024 辽宁省大连市甘井子区凌工路2号