发明名称 |
一种苯酚羟化酶基因工程菌转化吲哚制备靛蓝的方法 |
摘要 |
本发明属于生物工程技术领域,涉及将苯酚羟化酶基因重组于大肠杆菌体内形成工程菌,用于转化吲哚制备靛蓝的方法。通过获取GenBank注册号为EU339930的高效苯酚降解菌Arthrobacter sp.W1中总长为5490bp、Genbank注册号为FJ610336的苯酚羟化酶基因全长序列,连接至载体质粒(pET28a(+)Vector),并转化至宿主细胞大肠杆菌中构建苯酚羟化酶基因工程菌;生物转化反应液中苯酚羟化酶基因工程菌全细胞干重浓度为1~2g/L,吲哚浓度为100~600mg/L,葡萄糖浓度为0.5~2mmol/L,在20~40℃温度下,控制摇床转速在50~200r/min,振荡反应2~14小时。本发明的生物转化方法反应条件温和,产物浓度高,生产周期短,适合工业生产。 |
申请公布号 |
CN101851649A |
申请公布日期 |
2010.10.06 |
申请号 |
CN201010161539.7 |
申请日期 |
2010.04.28 |
申请人 |
大连理工大学 |
发明人 |
曲媛媛;李慧;周集体;时胜男;项学敏;乔森;吕红;张爱丽 |
分类号 |
C12P17/16(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12P17/16(2006.01)I |
代理机构 |
大连智慧专利事务所 21215 |
代理人 |
潘迅 |
主权项 |
一种苯酚羟化酶基因工程菌转化吲哚制备靛蓝的方法,其特征在于,苯酚羟化酶基因工程菌是通过获取GenBank注册号为EU339930的高效苯酚降解菌Arthrobacter sp.W1中总长为5490bp、Genbank注册号为FJ610336的苯酚羟化酶基因全长序列,连接至载体质粒(pET28a(+)Vector),并转化至宿主细胞大肠杆菌中构建的;生物转化反应时,反应液中苯酚羟化酶基因工程菌全细胞干重浓度为1~2g/L,吲哚浓度为100~600mg/L,葡萄糖浓度为0.5~2mmol/L,在20~40℃温度下,摇床转速为50~200r/min,振荡反应2~14小时。 |
地址 |
116024 辽宁省大连市甘井子区凌工路2号 |