一种以重组毕赤酵母高效发酵制备木聚糖酶的工艺

摘要

本发明涉及一种以重组毕赤酵母发酵制备木聚糖酶的改进工艺，属发酵工程领域。本发明中培养基采用低盐配方，各组分的质量百分比为，碳源3～6％、氮源2～3％、硫酸镁0.5～1.2％、硫酸钾0.5～1.0％，磷酸二氢钾0.2～0.5％。有效地改善了重组毕赤酵母的生长状况，节约了培养原料。此外，本发明通过调整诱导表达阶段甲醇的补加工艺，使甲醇的加入量与菌体的生长量相匹配，减少了甲醇的加入量，实现了低成本、高效发酵制备木聚糖酶。

主权项

一种以重组毕赤酵母高效发酵制备木聚糖酶的工艺，包括菌体分批发酵、补料发酵及外源基因的诱导表达阶段，其特征在于，在所说的分批发酵和补料发酵阶段中的培养基采用低盐配方，各组分的质量百分比为碳源3～6％、氮源1～3％、硫酸镁0.8～1.2％、硫酸钾0.5～1.0％，磷酸二氢钾0.2～0.5％；发酵温度为27～30℃，发酵pH为4.5～5.5，发酵时间为18～30h；所述外源基因的诱导表达阶段中，利用甲醇进行诱导，总诱导时间为110～140h，所说的甲醇诱导分为四个阶段：第一阶段为发酵时间的24h至60h，甲醇加入速率为每升培养液中每小时加入0.5～1.0毫升；第二阶段为发酵时间的60h至96h，甲醇加入速率为每升培养液中每小时加入1.0～1.5毫升；第三阶段为发酵时间的96h至120h，甲醇加入速率为每升培养液中每小时加入1.5～3.0毫升；第四发酵时间的120h至170h，甲醇加入速率为每升培养液中每小时加入3.0～4.5毫升。