一种纳米结构的导电聚苯胺固定化酶的制备方法

摘要

一种纳米结构的导电聚苯胺固定化酶的制备方法，步骤为：一、以苯胺单体自身作为“模板”，或使用具有表面活性剂的酸性掺杂剂作为“软模板”，或使用聚苯乙烯(PS)为“硬模板”，将其加入到分散有苯胺单体的去离子水中，室温下磁力搅拌至均匀乳状液，在静电力的作用下，然后，一次性加入氧化剂的水溶液，可得到具有纳米结构的导电聚苯胺，二、将制得的导电聚苯胺分散于磷酸缓冲溶液中搅拌至均匀，然后，将游离酶溶解于同样的缓冲溶液中，于60-120rpm的摇床价耦合，洗涤，去除上清液，得到纳米结构导电聚苯胺为载体的固定化酶。该方法制得的固定化酶可用于染料的脱色反应中，具有反应条件温和，降解效率高，可重复使用的优点。

主权项

一种纳米结构的导电聚苯胺固定化酶的制备方法，其特征在于包括以下步骤：一种纳米结构的导电聚苯胺固定化酶的制备方法，包括以下步骤：一、首先采用“无模板”法制备纳米结构的导电聚苯胺，将苯胺单体超声分散于水溶液中，苯胺单体与水溶液的比例按2-5mmol∶10-20mL，然后，一次性加入浓度为0.1-2M(mol/L)的氧化剂水溶液中，氧化剂为(NH2)2S2O8、Fe(NO3)3、FeCl3、Fe2(SO4)3或H2O2，氧化剂水溶液中氧化剂与苯胺单体的摩尔比为10∶1-1∶1，静置反应12-24小时，将混合溶液离心，离心后的固体依次用蒸馏水、无水乙醇和乙醚洗涤，最后在10-60℃下真空干燥18-24小时，得到墨绿色的导电聚苯胺纳米纤维；二、将制得的导电聚苯胺纳米纤维分散于pH范围为6-8的磷酸缓冲溶液中，导电聚苯胺纳米纤维与磷酸缓冲溶液分散时的比值按1-2g∶1L，室温下磁力搅拌至均匀，然后，将游离酶溶解于同样的缓冲溶液中，导电聚苯胺纳米纤维与游离酶的质量比为1∶0.0025-1∶1，4-10℃下在1-5体积份的缓冲溶液中于60-120rpm的摇床中共价偶联4-72小时，离心过滤，去除上清液，固定化酶用同样pH的缓冲溶液清洗3-5次，自然干燥，得到墨绿色的纳米结构导电聚苯胺固定化酶，4℃冰箱中保存。