薄层色谱法鉴别白术药材的方法

摘要

本发明公开的薄层色谱法鉴别白术药材的方法，以苍术酮、白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ三种指标化合物为对照品，用甲醇配制成对照品溶液，以甲醇超声提取白术药材制备供试品溶液；吸取对照品及供试品溶液，分别点样于同一硅胶G薄层板上，分别以60-90℃石油醚-乙酸乙酯以及环己烷-醋酸乙酯为展开剂，进行二次展开，取出、晾干，以硫酸乙醇溶液显色后，在自然光及波长365nm下检视进行鉴别，在与三种对照品相同Rf值位置，显相同颜色斑点的供试药材为白术药材。该鉴别方法专属性强、操作简便，能够准确鉴别白术药材，明确区分白术及其易混淆品-苍术。

主权项

薄层色谱法鉴别白术药材的方法，包括以下步骤：1)对照品溶液的制备：称取苍术酮置于刻度试管中，加甲醇使苍术酮充分溶解，摇匀，配制质量浓度为1mg/ml的苍术酮对照品溶液；称取白术内酯置于刻度试管中，加甲醇使白术内酯Ⅰ充分溶解，摇匀，配制质量浓度为1mg/ml的白术内酯Ⅰ对照品溶液；称取白术内酯Ⅲ置于刻度试管中，加甲醇使白术内酯Ⅲ充分溶解，摇匀，配制质量浓度为1mg/ml的白术内酯Ⅲ对照品溶液；2)药材供试品溶液制备：称取干燥白术样品，置于锥形瓶中，加10倍样品重量的甲醇，超声提取，用滤纸过滤，滤液于室温自然挥发至白术药材含量为1g/ml，得白术药材供试品溶液；称取干燥苍术样品，于锥形瓶中，加10倍样品重量的甲醇，超声提取，用滤纸过滤，滤液于室温自然挥发至白术药材含量为1g/ml，得苍术药材供试品溶液。3)用微量点样器分别吸取上述制得的苍术酮对照品溶液、白术内酯Ⅰ对照品溶液、白术内酯Ⅲ对照品溶液、白术药材供试品溶液及苍术药材供试品溶液各2μl，依次手工点样于同一硅胶G薄层板同一水平线的不同位置上。4)取乙酸乙酯和60-90℃的石油醚，按照体积比1∶50混合均匀，得到展开剂一，置干燥洁净双槽层析缸的第一个槽中；5)将步骤3)的硅胶G薄层板，置于步骤4)双槽层析缸无展开剂的第二个槽中，密闭缸盖，预饱和10-15分钟后，将上述双槽层析缸第一个槽中的展开剂一转移到放有硅胶G薄层板的第二个槽中，进行上行展开，展距8cm，结束展开，取出薄层板，晾干。6)取环己烷与乙酸乙酯，按照体积比3∶1～4∶1，混合均匀，或者取正己烷与乙酸乙酯，按照体积比4∶1，混合均匀，得到展开剂二，置于步骤5)双槽层析缸已清空的第一个槽中；7)取步骤5)晾干的硅胶G薄层板，置于步骤6)双槽层析缸无展开剂的第二个槽中，密闭缸盖，预饱和10-15分钟后，将上述双层层析缸第一个槽中的展开剂二转移到放有硅胶G薄层板的第二个槽中，进行上行展开，展距5cm，结束展开，取出薄层板，晾干。8)配制显色剂：取无水乙醇，用移液管量取无水乙醇1/9体积量的浓硫酸，浓硫酸质量浓度为98％，将移液管伸至无水乙醇液底部加入浓硫酸，混合均匀得显色剂，将显色剂置于浸渍槽或电动喷雾器中备用。9)将步骤7)晾干的硅胶G薄层板，浸入步骤8)浸渍槽中，5S内取出薄层板，或者以电动喷雾器将步骤8)显色剂均匀喷至步骤7)晾干的硅胶G薄层板上；用热风吹硅胶G薄层板至斑点显色清楚，获得色谱图；10)于自然光及365nm波长光源下检视步骤9)硅胶G薄层板并拍照，按下述方法比较色谱图中的斑点鉴别白术：自然光下检视，色谱图中苍术酮对照品显示为红色的斑点；在与苍术酮对照品相同的Rf值位置，白术药材供试品及苍术药材供试品都有相同的红色斑点；白术内酯Ⅰ及白术内酯Ⅲ对照品在色谱图中无斑点；365nm紫外灯下检视，色谱图中白术内酯Ⅲ及白术内酯Ⅰ对照品分别显示为蓝色荧光斑点，苍术酮对照品显示为黄色荧光斑点；在与苍术酮、白术内酯Ⅲ及白术内酯Ⅰ对照品相同的Rf值位置，白术药材供试品显示相同颜色的荧光斑点，而苍术药材供试品，仅在与苍术酮相同的Rf值位置有相同颜色的斑点，而在与白术内酯Ⅲ及白术内酯Ⅰ对照品相同的Rf值位置，无相同颜色的荧光斑点。