发明名称 简便易行的食用菌基因组DNA提取方法
摘要 本发明提供一种简便易行的食用菌基因组DNA提取方法,该方法包括:取材;研磨;加缓冲液振荡后离心;放置沉淀;离心;洗涤沉淀,风干;溶解沉淀,保存等步骤。用本发明方法提取食用菌的基因组DNA时间短、操作简单、成本低、提取效率高。
申请公布号 CN101831421A 申请公布日期 2010.09.15
申请号 CN201010162835.9 申请日期 2010.04.28
申请人 北京市农林科学院 发明人 许峰;刘宇;王守现;赵爽;耿小丽;孟莉莉;王兰青;魏民
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 北京瑞盟知识产权代理有限公司 11300 代理人 王明书
主权项 一种简便易行的提取食用菌基因组DNA的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)取材:取菌丝体或子实体于离心管中;(2)加入少量石英砂,用研磨杵对菌丝体或子实体进行研磨至糊状;(3)依次加入STES缓冲液,TE缓冲液,酚-氯仿液于离心管中,涡旋振荡1-3min;(4)离心:10,000-13,000r/min离心5-7min;(5)取离心后的上层水相至另一离心管中,加入预冷无水乙醇或异丙醇,颠倒混匀,-20℃-4℃放置沉淀15-30min;(6)离心:10,000-13,000r/min离心10-13min;(7)弃上清,用70%乙醇洗涤沉淀,风干;(8)加入ddH2O和RNaseA溶液中,完全溶解沉淀,-20℃保存。
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