发明名称 番茄黑环病毒的检测方法
摘要 本发明公开了一种番茄黑环病毒(TBRV)的检测方法,本发明针对TBRV不同分离物外壳蛋白基因的保守序列设计特异性引物和MGB探针,利用TBRV的不同分离物,建立了TBRV的反转录PCR(RT-PCR)和实时荧光PCR的检测方法。本发明利用引物和探针可以特异性区分番茄黑环病毒,且大大缩短了检测时间,检测的灵敏度也大大提高。
申请公布号 CN101200770B 申请公布日期 2010.09.15
申请号 CN200610119554.9 申请日期 2006.12.13
申请人 中华人民共和国上海出入境检验检疫局 发明人 杨云;于
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/70(2006.01)I
代理机构 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 代理人 王函
主权项 一种番茄黑环病毒的检测方法,其特征在于,采用实时荧光PCR检测方法,包括如下步骤:(1)设计引物和探针;步骤(1)中所述设计的引物为:TBRV-CP 133-F:5’-TCGTTTCTTGCAGTTTGCGTAT-3’;TBRV-CP 133-R:5’-GTGGCAAAGAAGGGAGACTGTATT-3’;步骤(1)中所述设计的探针为:TBRV-CP-MGB-FAM:5’(FAM)-CACAGATACCACATGTGGA-3’(MGB);(2)番茄黑环病毒RNA提取和cDNA第一链合成;(3)采用设计的引物和探针进行PCR扩增,检测结果。
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