利用食用、药用真菌发酵黄浆水生产多糖的方法

摘要

本发明公开了利用食用、药用真菌发酵黄浆水生产多糖的方法，属于生物提取综合利用技术领域。方法包括：黄浆水的预处理；培养基的配制；种子液、生产培养基的接种培养；从菌丝体中提取真菌胞内多糖；从发酵滤液中提取真菌胞外多糖等步骤。本发明以生产豆制品过程中产生的废弃黄浆水为基础原料，通过食用或药用真菌深层发酵的方法，使其中的营养成分得到最大程度的生物转化。具有投资少，原料成本低，操作简单，降低对环境污染，多糖产量高，且降低生产成本50％左右等优点。本发明可在豆制品与生化企业推广应用。

主权项

利用食用、药用真菌发酵黄浆水生产多糖的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：(1)对黄浆水的预处理：将豆制品加工过程中产生的黄浆水，用世韩牌0.2MPa反渗透膜浓缩至固形物含量达30％后，备用；(2)培养基的配制：包括，1)种子培养基：按重量葡萄糖1.5％，K2HPO4 0.5％，MgSO4 0.2％，用预处理后的黄浆水补足至100％，调pH为6，灭菌后，备用；2)生产培养基：按重量葡萄糖、蔗糖或红糖中的任一种或两种的混合物0.5-2％，K2HPO4 0.1-0.5％，MgSO4 0.05-0.2％，用预处理后的黄浆水补足至100％，调pH 6，灭菌后，备用；(3)菌种活化：将食用或药用真菌的菌种接种在PDA斜面培养基上，于25-28℃恒温培养7-10天后，置4℃冰箱中保存，备用；(4)种子液的接种培养：将活化菌种按重量1-3％接种量接入步骤(2)种子培养基中，在25-28℃下静止培养6天成种子液；(5)生产培养基的接种培养：将种子液中的菌丝体在无菌条件下水洗、打碎后，按200mg湿润菌丝体/每升培养基计接入步骤(2)生产培养基中，在25-28℃下震荡培养7天；用离心机分离成菌丝体和发酵滤液后，分别保存；(6)从菌丝体中提取真菌胞内多糖：将步骤(5)的菌丝体用胶体磨研磨、匀浆后加5倍水，混匀；超声提取30-60分钟后，将该液温度升至90-100℃再浸提60分钟，并重复操作3次；用板框过滤收集滤液，用世韩牌0.2MPa反渗透膜浓缩至滤液较浑浊时，再加入3倍体积的95％乙醇进行醇沉，离心、干燥、粉碎后得真菌胞内多糖；(7)从发酵滤液中提取真菌胞外多糖：将步骤(5)的发酵滤液超声提取15-30分钟后，用世韩牌0.2MPa反渗透膜浓缩至滤液较浑浊时，加入3倍体积的95％乙醇进行醇沉，于冰箱中静置过夜，离心、干燥、粉碎得真菌胞外多糖。