一种蓝藻多糖的分离纯化方法

摘要

一种蓝藻多糖的分离纯化方法，属于生化分离技术领域。本发明步骤为：蓝藻多糖粗提取液的制备；絮凝剂处理蓝藻多糖粗提液；减压浓缩；乙醇沉淀蓝藻多糖；沉淀进行洗脱，而后真空干燥，获得一定纯度的蓝藻多糖。本发明涉及以絮凝剂絮凝杂质，不采用通常的等电点法、sevage法等去除蛋白质等杂质。采用本发明简化了纯化过程的步骤，操作简单，而且降低了制备过程中化学试剂使用量，节约了资源，所得多糖纯度最高可达91.18％。原料采用鲜藻或干藻粉，甚至是野外的太湖水华蓝藻，从而提供了一种解决藻类资源规模化利用的技术方法。

主权项

一种蓝藻多糖的分离纯化方法，其特征在于步骤为：蓝藻多糖粗提取液的制备；絮凝剂处理蓝藻多糖粗提取液；减压浓缩；乙醇沉淀蓝藻多糖；沉淀进行洗脱，真空干燥，获得纯度84％以上的蓝藻多糖；(1)蓝藻多糖粗提取液的制备：采用水作提取剂，藻粉或鲜藻与水的固液质量比为1∶20～30，搅拌均匀后浸泡1h，置于80～100℃下加热搅拌4h后，蓝藻破壁液3800～6000r/min离心10-15min，所得离心后清液，即为蓝藻多糖粗提取液；(2)絮凝剂处理蓝藻多糖粗提取液：在容器中加入蓝藻多糖粗提取液，添加絮凝剂工作液，絮凝剂在蓝藻多糖粗提取液中的含量为5ppm～50ppm，先200r/min快速搅拌1min，再50r/min慢速搅拌15min，室温下静置0.5～24h后，3800r/min离心15min，沉淀去除，得到上层液体；所述的絮凝剂为聚铁或聚丙烯酰胺类絮凝剂；(3)减压浓缩：将步骤(2)中获得的液体旋转蒸馏得浓缩液，浓缩液体积为液体未浓缩前体积的1/10；(4)乙醇沉淀蓝藻多糖：将步骤(3)中获得的浓缩液加入1～10倍体积的95％乙醇，搅拌均匀后置于-4℃冷藏过夜，3800r/min离心15min，得到沉淀；(5)沉淀洗脱、真空干燥：将收集的沉淀用丙酮、乙醚各洗脱两次，洗脱后的沉淀真空干燥，得到纯度84％以上的蓝藻多糖。