发明名称 |
特异序列基础的水通道蛋白4高效价抗体的制备及应用 |
摘要 |
本发明属于生物工程技术领域,涉及特异序列基础的水通道蛋白4高效价抗体的制备及应用,利用基因工程技术,将小鼠AQP4基因近3′端亲水区克隆到原核表达载体中。经酶切和序列分析后,用重组质粒转化大肠杆菌,并经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导产生GST-AQP4融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备抗血清。抗血清的效价及特异性采用ELISA和Western blot检测。构建融合蛋白原核表达载体,可高效表达特异性的融合蛋白,获得抗GST-AQP4融合蛋白的高效价抗血清。该抗AQP4多克隆抗体效价与特异性均较良好,适合对AQP4的检测应用。为从蛋白水平深入研究AQP4功能提供了必要的实验工具。 |
申请公布号 |
CN101830983A |
申请公布日期 |
2010.09.15 |
申请号 |
CN201010164851.1 |
申请日期 |
2010.05.07 |
申请人 |
东北师范大学 |
发明人 |
李晓萌;张淑芝;汪小莞;关新刚;杨南扬;麻彤辉 |
分类号 |
C07K16/16(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;G01N33/53(2006.01)I |
主分类号 |
C07K16/16(2006.01)I |
代理机构 |
长春市东师专利事务所 22202 |
代理人 |
刘延军;修雪静 |
主权项 |
特异序列基础的原核表达GST-AQP4融合蛋白的多克隆抗体,其特征在于利用特异序列原核表达的GST-AQP4融合蛋白作为抗原免疫动物产生抗血清而获得,该抗血清中抗GST-AQP4抗体的滴度高达1∶50000,并经过Western blot和免疫组化鉴定抗GST-AQP4血清具有较好的特异性,其中,所述的特异序列是指AQP4基因近3′端亲水区的一段序列,其氨基酸序列为:tkgsymev ednrsqvete dlilkpgvvh vididrgeek kgkd核苷酸序列为:781 tgtcctgatg tggagctcaa acgtcgcctt841aaggaagcct tcagcaaagc cgcgcagcag acaaaaggga gctacatgga ggtggaggac901aaccggagcc aagtggagac ggaagacttg atcctg |
地址 |
130024 吉林省长春市人民大街5268号 |