摘要 |
Un método para modificar enzimáticamente un ácido nucleico diana, por reacción de ligación independiente del molde, o ligación de extremos romos o por PCR, en donde un conjugado que comprende un ácido nucleico (NA) constituido por 1 a 5 nucleótidos para reacciones de ligación independientes del molde, en donde el NA del conjugado y el ácido nucleico adicional son monocatenarios, o para reacciones de ligación con extremos romos, en donde el NA del conjugado y el ácido nucleico adicional son bicatenarios, y en donde el NA del conjugado se modifica por ligación de un término del NA a al menos un ácido nucleico adicional, o 10 a 40 nucleótidos para PCR y al menos una unidad sintética de fijación (SBU) seleccionada del grupo constituido por p-RNAs y p-DNAs, y en donde la SBU está enlazada covalentemente por su extremo 2' con el extremo 5' del ácido nucleico (NA) o por su extremo 2' con el extremo 3' del ácido nucleico (NA) o por su extremo 4' con el extremo 3' del ácido nucleico NA o por su extremo 4' con el extremo 5' del ácido nucleico (NA), utilizando el ácido nucleico del conjugado como sustrato, comprendiendo el método: a)poner en contacto el conjugado con al menos una enzima seleccionada del grupo constituido por una polimerasa, y una ligasa que utiliza los ácidos nucleicos existentes naturalmente como sustrato, y con otros reactivos necesarios para la acción de la enzima; y b)incubar la mezcla obtenida en a) en condiciones adecuadas para el funcionamiento de la enzima durante un periodo de tiempo suficiente para efectuar la modificación del ácido nucleico.
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