一种固定化酶的含卟啉超细纤维膜的制备方法

摘要

本发明公开了一种固定化酶技术，旨在提供一种固定化酶的含卟啉超细纤维膜的制备方法。该制备方法将含羧基聚丙烯腈与卟啉按一定比例直接混合，配成均匀溶液，然后进行静电纺丝制备超细纤维膜；将超细纤维膜用缓冲溶液湿润后在1-乙基-3-(N，N-二甲基氨丙基)碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺溶液中活化；再将活化后的超细纤维膜中浸没于酶溶液中，固定化反应一段时间后即制得固定化酶的含卟啉超细纤维膜。本发明制备工艺简单、步骤少、原材料利用率高、制备时间短，而且所制备的固定化酶催化活力高，具有良好的应用前景。

主权项

一种固定化酶的含卟啉超细纤维膜的制备方法，包括以下步骤：(1)将含羧基聚丙烯腈与卟啉按质量比4～49∶1混合，并溶解于二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，配置成浓度为20～200g/L的溶液；(2)将步骤(1)中所制备的溶液静置脱泡，在室温下进行静电纺丝制得超细纤维膜，纺丝电压为15kV、纺丝液流速为0.5～10mL/h、喷头到接收板距离为15cm；(3)将步骤(2)中收集到的超细纤维膜烘干去除残留的溶剂，分别用水和磷酸盐缓冲溶液冲洗，然后在摩尔比为1∶1的1-乙基-3-(N，N-二甲基氨丙基)碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺水溶液中浸泡3小时，其中1-乙基-3-(N，N-二甲基氨丙基)碳二亚胺的浓度为20mg/mL；(4)将步骤(3)中活化后的超细纤维膜用磷酸盐缓冲溶液充分洗涤，然后浸泡于浓度为1～20mg/mL的酶溶液中，室温下固定化1～3小时后用磷酸盐缓冲溶液充分洗涤后即得固定化酶的含卟啉超细纤维膜；所述的酶是过氧化氢酶、过氧化物酶或葡萄糖氧化酶其中任意一种；所述磷酸盐缓冲溶液pH＝7.0，离子强度为0.05M。